RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
瞬時轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:
1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。
2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。
4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。
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大件運輸?shù)娘L險評估是對可能發(fā)生的各種風險和潛在危險進行評估的過程。這個評估過程包括對運輸路線的安全性和可行性進行評估,對運輸車輛和設(shè)備的可靠性和適用性進行評估,以及對可能遇到的天氣條件和交通狀況等進行 。
具體而言,做到財稅合規(guī)的三項工作:一、健全內(nèi)部管理制度,規(guī)避稅務(wù)風險構(gòu)建內(nèi)部管理機制,確保財務(wù)報告的可靠性和合規(guī)性,主要是通過制訂內(nèi)部控制制度和規(guī)章制度,對各個部門的職責和權(quán)限進行明確,構(gòu)建出一種行之 。
AV-1型報警止回閥是分離閥座圈,橡膠襯面閥瓣,水流報警止回閥。用于濕式自動噴水滅火系統(tǒng),可直立或水平安裝。當系統(tǒng)流入相當于一只或多只噴頭的穩(wěn)定流量后,可自動啟動電動和/或水力報警裝置。設(shè)計要求1.必 。
水量過少會影響流動性。過多則會降低固化后的強度。五、自流平施工—鋪設(shè)1、將攪拌好的自流平漿料傾倒在施工的地坪上,它將自行流動并找平地面,如果設(shè)計厚度≤毫米,則需借助**的齒刮板稍加批刮。2、隨后應(yīng)讓施 。
銨離子電極/氨氮電極的應(yīng)用環(huán)境涉及工業(yè)軟化水、中水回用、工業(yè)循環(huán)水、農(nóng)業(yè)種植動態(tài)檢測、植物組織以及育種營養(yǎng)液動態(tài)監(jiān)控、水產(chǎn)品以及水產(chǎn)養(yǎng)殖、生物醫(yī)藥研究、臨床動態(tài)血銨離子檢測、科研教育教學、牛奶和相關(guān)奶 。
具體而言,做到財稅合規(guī)的三項工作:一、健全內(nèi)部管理制度,規(guī)避稅務(wù)風險構(gòu)建內(nèi)部管理機制,確保財務(wù)報告的可靠性和合規(guī)性,主要是通過制訂內(nèi)部控制制度和規(guī)章制度,對各個部門的職責和權(quán)限進行明確,構(gòu)建出一種行之 。
在日式風格的辦公室室內(nèi)設(shè)計中,墻壁的顏色大多是單一色系,即便使用對比色,也會避免太過大膽的顏色。大多物品、設(shè)備遵循以小見大的設(shè)計原則來進行陳設(shè),如家具的選擇著重于小型、典雅與質(zhì)感,風格采用木質(zhì)結(jié)構(gòu),不 。
職稱起初源于職務(wù)名稱,理論上職稱是指專業(yè)技術(shù)人員的專業(yè)技術(shù)水平、能力,以及成就的等級稱號,是反映專業(yè)技術(shù)人員的技術(shù)水平、工作能力的標志。隨著社會發(fā)展的需要,逐步產(chǎn)生了對專業(yè)技術(shù)人員的水平評價與聘任崗位 。
隨著經(jīng)濟社會發(fā)展和城市化進程的加速,傳統(tǒng)煤煙型污染尚未得到控制,而以臭氧、PM2.5和酸雨為特征的區(qū)域性復合型大氣污染卻日益突出。其中,PM2.5污染居高不下、來源復雜,導致我國中東部大氣復合污染的態(tài) 。
無塵車間的好處包括:1.保障產(chǎn)品的質(zhì)量:無塵車間通過控制空氣中的顆粒物和微生物數(shù)量,可以減少對產(chǎn)品的污染程度,提高產(chǎn)品的質(zhì)量。2.提高生產(chǎn)的效率:無塵車間中采用的空氣過濾、凈化設(shè)備可以有效去除空氣中的 。
推土機在陡坡上前進下坡時,如果需要轉(zhuǎn)向,操縱過程可與一般情況下轉(zhuǎn)向操縱過程相同。但由于在陡坡上推土機本身重量可產(chǎn)生下滑的趨勢,所以拉轉(zhuǎn)向與制動操縱桿的全程所用時間不宜過長。如果拉操縱桿行程的一半,使一 。